2017年石景山区中学生研究性学习成果二等奖:枇杷叶中黄酮的含量

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组长:郭晨霄   组员:刘铭轩、信卓宁、巴雨桐、杨润聪、雒皓天、孙翰翔

指导教师:张海南 王红光

获2017年石景山区中学生研究性成果二等奖

【摘要】由于黄铜在诸多方面的显著功效,在植物中提取天然黄铜最为健康安全,所以我们将关注点放在从枇杷叶中提取天然黄铜,并测量该植物中黄铜的具体含量,检测该植物是否适合长期大量提取黄铜。
【关键词】枇杷叶  黄酮  超声波震碎仪
一、引言
        黄酮的功效是多方面的,它是一种很强的抗氧剂,可有效清除体内的氧自由基,如花青素可以抑制油脂性、过氧化物的全阶段溢出,这种阻止氧化的能力是维生素E的十倍以上,这种抗氧化作用可以阻止细胞的退化、衰老,也可阻止癌症的发生。它可以改善血液循环,可以降低胆固醇,向天果中的黄酮还含有一种PAF抗凝因子,这些作用大大降低了心脑血管疾病的发病率,也可改善心脑血管疾病的症状。
        同时,被称为花色苷酸的黄酮化合物在动物实验中被证明可以降低26%的血糖和39%的三元脂肪酸丙酯,这种降低血糖的功效是很神奇的,但更重要的是它对稳定胶原质的作用,因此它对糖尿病引起的视网膜病及毛细血管脆化有很好的作用。另外,它还可以抑制炎性生物酶的渗出,可以增进伤口愈合和止痛,栎素由于具有强抗组织胺性,可以用于各类敏感症。
        所以,基于以上黄铜的诸多重要功效,本试验试图从枇杷叶中提取天然黄铜,并测量黄铜的具体含量,为其他研究人员提供数据支撑。
二、研究背景
        枇杷叶为蔷薇科植物枇杷的干燥叶,别名巴叶、芦桔叶, 广泛分布于我国中南及陕西、甘肃、江苏、安徽、浙江、江西、福建、台湾、四川、贵州、云南等地。枇杷叶是一味常用中药,其味苦、微辛,性微寒,主治肺热咳嗽、阴虚劳咳、湿疹等症。
        目前从枇杷叶中可以分离出多种黄酮类成分。同时,研究发现黄酮类化合物具有良好的抗氧化、降血脂、抗炎增强免疫等作用,是枇杷叶中的有效成分。因此对枇杷叶中黄酮类成分进行含量测定对枇杷叶的质量控制有重要意义。
三、研究仪器及材料
    1.实验仪器:音波震碎仪,细胞观察器,试管。
    2.实验材料:枇杷叶。
四、研究方法
        乙醇法提取枇杷叶中的黄酮量。
五、研究目的
        认识枇杷叶药材,了解黄酮类成分的显色反应,熟悉中药有效成分的含量测定过程。
六、实验步骤
        1.药材采集:从中山植物园药物园中采集枇杷叶药材,了解枇杷叶的形态、习性和生长环境。
        2.样品预处理:对采集样品洗净、烘干、粉碎。了解中草药的处理过程。
        3.样品提取:精密称取2.0g样品粉末至三角瓶中;加入50ml70%乙醇溶液;放入超声仪中,超声提取1次,每次提取40min。过滤,取25mL续滤液。另精密称取芦丁对照品用70%乙醇溶解配置成对照品溶液0.345mg/mL。
        4.样品总黄酮含量测定:对枇杷叶样品进行黄酮成分含量测定,了解黄酮的显色反应和含量测定步骤。精密移取0,5,10,20,30,40,50μL芦丁标准溶液于96孔平板中,以70%乙醇溶液为空白。依次加入3μL 5% 亚硝酸钠溶液,摇匀,静置6min;再加入3μL 10% 硝酸铝溶液,摇匀,静置6min;再加入40μL 的4%氢氧化钠溶液,以70%乙醇溶液补足溶剂至100μL,摇匀,静置15min;将96孔平板放入酶标仪中在510nm波长处测吸光值,每个检测做3个重复,取其平均值。以吸光值(y)和芦丁含量(x)绘制总黄酮含量标准曲线。
七、数据分析

八、实验结果及分析
        我们使用的材料是琵琶叶,进行洗净烘干后用粉碎机粉碎,装入密封袋备用,然后进行称重,每袋的重量必须是一样的,在进行完装袋后,我们来到了实验室。首先我们采用了用乙醇浸泡进行的一次实验。在这次实验中用乙醇浸泡需要八个夜晚,由于我们因为时间有限,所有用的是泡好的,装入进行超声波震动,以震碎细胞的方式,提取黄酮。在这之中首先要做的是在震动容器中是震动四十分钟。四十分钟后我们来到了教室,这时我们已经提取了第一波黄酮,这就是用乙醇提取黄酮的方法,然而我们看到的液体是呈淡黄色的,闻起来没有非常刺鼻的异味,然后我们将这种液体倒入试管中,放入细胞,进行观察,发现细胞已经破裂,而这都是因为音波将细胞震碎的原因。这样我们能更好的观察到提取黄酮的过程,以及结果。最后得出结论是,把枇杷叶放入乙醇中,在音波震碎仪下进行六十分钟的震碎,这样细胞可以完全破裂,我们就可以观察到在枇杷叶中提取的黄酮。最后放入观察镜下进行观察得取结论。
        枇杷是小乔木,叶边缘程锯齿状,叶背面有微小绒毛,花期在11月到1月,1月份可见枇杷叶白色花朵。芦丁对照品和样品在加入3种显色剂后,液体显红色。
        在这次实验中,我们小组收获到了团结友谊以及分工协作的好处,这样可以事半功倍,在这次的观察中我们也观察到了一些有关于用乙醇提取枇杷叶中黄酮的过程,而且接触到了许多仪器,并且学会了使用它们,这在我们今后的物理和化学学习中将起到非常大的作用,但这次我们也有一些缺点,比如:起初小组做实验时有些手忙脚乱,有些时候在实验推测时会有些争议,但在后面的学习和实验过程中我们都化解了这些问题,并且变得十分团结,总之这次科考活动让我们受益匪浅。

致谢词
        感谢辅导老师在这次活动中给予我的无微不至的关怀和照顾!老师们在学习和生活中对我的关怀和教导使我受益匪浅,终生难忘。他们严谨的工作作风和治学态度,渊博的学术知识,认真的工作精神都给我留下了深刻的印象,是我终生学习的榜样。还有那些在背后默默无闻的科学家们,是他们在教我们,在培育我们,他们看上去和普通人一样始终不告诉别人自己的身份,有了他们,中国才会像今天一样强大,如果没有他们中国将会任人欺辱,所以在此,我们小组向敬爱的老师和科学家们致以最衷心的感谢!

参考文献:
1.江苏新医学院.中药大辞典(上册)上海科学技术出版社1977-2539
2.谭仁祥,孟军才,陈道峰等.植物成分分析.北京科学出版社2002
3.陈剑,李维林,吴菊兰等.枇杷叶的化学成分.植物资源与环境学报2006
4.郭建平,宫明利,陈启蒙,葛根黄酮滴丸对离体豚鼠心脏冠脉血流量的影响.药物研究2008
5.王立为,刘新民,余世春等,枇杷叶抗炎和止咳作用的研究.中草药2004